蜂蜜中5種頭孢菌素殘留量的測定——分析條件的選擇

時間：2023-03-25 06:19:40來源：food欄目：食品快速檢測閱讀：

蜂蜜中5種頭孢菌素殘留量的測定——分析條件的選擇

[db:作者] / 2022-12-09 00:00

5.2.5.7 分析條件的選擇

(1)固相萃取柱的選擇

在本方法的研究中，用OasisHLB固相萃取柱、BUNDELUT C18固相萃取柱、ENVI-18固相萃取柱、Octadecyl C18固相萃取柱、LiChrolutEN固相萃取柱和Sep-Pak C18固相萃取柱共六種固相萃取柱對5種頭孢菌素的提取效率和凈化效果進(jìn)行了比較。實驗發(fā)現(xiàn)，Sep-Pak C18固相萃取柱回收率低(只有50%～60%)，且凈化效果也不理想，Sep-Pak C18固相萃取柱不適合本方法。ENVI-18固相萃取柱、LiChrolutEN固相萃取柱和Octadecyl C18固相萃取柱的回收率均好，但樣品溶液過柱速度較慢，樣品預(yù)處理時間長，有的還存在著不同批次之間回收率的不穩(wěn)定。OasisHLB固相萃取柱、BUNDELUT C18固相萃取柱對5種頭孢菌素的提取效率和凈化效果較好，5種頭孢菌素回收率的重現(xiàn)性也優(yōu)于其他固相萃取柱。而OasisHLB固相萃取柱樣品溶液過柱速度優(yōu)于BUNDELUT C18固相萃取柱，因此，本方法選用OasisHLB固相萃取柱作為樣品凈化柱。

(2)提取溶液的選擇

在本方法的研究中，根據(jù)蜂蜜樣品的特點(diǎn)和被測物的性質(zhì)，確定磷酸二氫鈉緩沖溶液作為提取液。通過回收率實驗，比較了提取液中磷酸二氫鈉緩沖溶液濃度和pH值對5種頭孢菌素回收率的影響，結(jié)果見表5-37和表5-38。

表5-37 提取液濃度對5種頭孢菌素回收率(%)的影響

表5-38 提取液pH對5種頭孢菌素回收率(%)的影響

從表5-37和表5-38可以看出，當(dāng)提取液中磷酸二氫鈉濃度為0.15mol/L，pH為8.5時，5種頭孢菌素回收率最佳，因此，本方法使用pH8.5，0.15mol/L磷酸二氫鈉溶液作為提取液。

(3)固相萃取柱洗脫條件的選擇

本方法比較了用1mL、2mL、3mL乙腈作為固相萃取柱的洗脫劑，對5種頭孢菌素回收率產(chǎn)生的影響，結(jié)果見表5-39。實驗表明，當(dāng)洗脫劑用量為2mL時，5種頭孢菌素的回收率為94.5%～98.7%。當(dāng)洗脫劑用量為3mL時，5種頭孢菌素回收率沒有明顯改善。因此，本方法選用2mL乙腈作為固相萃取柱的洗脫劑。

表5-39 固相萃取柱洗脫劑用量對回收率(%)的影響

(4)液相色譜分析柱的選擇

分別使用uBondapak C18 300mm×4.0mm色譜柱和ZORBAXSB- C18 3.5um 150mm×2.1mm色譜柱對5種頭孢菌素的色譜行為進(jìn)行了比較。實驗發(fā)現(xiàn)，這兩種色譜柱的靈敏度均能滿足要求，但μBondapak C18 300mm×4.0mm色譜柱流速在1.5mL/min，進(jìn)質(zhì)譜儀之前必須分流，而分流時對5種頭孢菌素結(jié)果的測定產(chǎn)生一定誤差，而使用ZORBAXSB-C18 3.5μm150mm×2.1mm柱不需分流，定量準(zhǔn)確度優(yōu)于μBondapak C18柱，通過以上對兩種色譜柱的比較，本方法選用ZORBAXSB-C18 3.5um 150mm×2.1mm為5種頭孢菌素的分析柱。

(5)質(zhì)譜條件的確定

采用注射泵直接進(jìn)樣方式，以5μL/min分別將頭孢唑啉、頭孢匹林、頭孢氨芐、頭孢洛寧、頭孢喹肟標(biāo)準(zhǔn)溶液注入離子源，用正離子檢測方式對5種頭孢菌素進(jìn)行一級質(zhì)譜分析(Q1掃描)，得到質(zhì)子化分子離子峰分別為456、424、348、459、529，再對分子離子進(jìn)行二級質(zhì)譜分析(子離子掃描)，得到碎片離子信息。然后對去簇電壓(DP)，碰撞氣能量(CE)，電噴霧電壓、霧化氣和氣簾氣壓力進(jìn)行優(yōu)化，使分子離子與特征碎片離子對強(qiáng)度達(dá)到最佳。然后將質(zhì)譜儀與液相色譜聯(lián)機(jī)，再對離子源溫度，輔助氣流速進(jìn)行優(yōu)化，使樣液中5種頭孢菌素離子化效率達(dá)到最佳。

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